Направления деятельности:

• Изучение молекулярной биологии и экспрессии генов системы метаболизма ксенобиотиков и молекулярных механизмов социально-значимых заболеваний в клинических и экспериментальных исследованиях.
• Изучение эффектов вновь создаваемых синтетических потенциальных лекарственных соединений в отношении регуляторных молекул и сопряженных с ними сигнальных ферментых каскадов, опосредующих фармакокинетику лекарств.

Гришанова Алевтина Юрьевна окончила Новосибирский государственный университет в 1975 г.

С 1975 по 1992гг. работала в Институте Клинической и Экспериментальной Медицины СО АМН СССР, затем с 1992 по 1998 гг. – в НИИ молекулярной патологии и экологической биохимии СО РАМН, и с 1998 г – в НИИ молекулярной биологии и биофизики СО РАМН

Основным направлением научной деятельности Гришановой А.Ю. являются фундаментальные и прикладные исследования процессов биотрансформации чужеродных химических веществ в организме человека и животных системой монооксигеназ.

Исследования были посвящены механизмам регуляции экспpессии генов цитохpомов P450,  негативной регуляции индукции цитохромов Р450 подсемейства 1А, индуцируемых полициклическими ароматическими углеводородами и участвующих в метаболической активации этих проканцерогенов, а также изучение клеточных механизмов множественной лекарственной устойчивости опухолей и роли генетического полиморфизма ферментов биотрансформации ксенобиотиков и транспортных белков в белковой экспрессии этих генов и формировании множественной лекарственной устойчивости опухолей различной этиологии.

Результаты исследований лаборатории связаны в основном с изучением механизмов регуляции активности феpментов метаболизма чужеpодных соединений (цитохромов Р450), с выяснением последствий однонуклеотидных замен в генах цитохромов Р450, участвующих в биотрансформации противоопухолевых лекарств, для эффективности лекарственной терапии и выявление генов CYP, которые оказывают влияние на индивидуальный ответ на противоопухолевые лекарства, с выяснением на экспериментальной модели молекулярно-генетических предпосылок развития макулярной дегенерации, связанной со старением, а также исследований вновь создаваемых синтетических соединений в качестве потенциальных лекарственных агентов.

В исследованиях феномена индукции ферментов монооксигеназной системы печени было обнаружено индуцирующее влияние холода на активность цитохромов Р450 подсемейства 1А — CYP1A, печени крыс. Исследование механизма, лежащего в основе увеличения активности цитохромов Р450 подсемейства 1А в печени крыс при воздействии на организм умеренного холода, позволило установить механизм индукции CYP1A1 в печени при воздействии на организм холода, который состоит в транскрипционной активации гена CYP1A1 с участием AhR. Показано, что эндогенным посредником в индукции CYP1А1 под действием холода может быть альфа-токоферол.

Исследована возможная роль тирозиновых протеинкиназ в активации CYP1A в печени экспериментальных животных под действием холода при использовании в качестве инструмента исследования ингибиторов тирозиновых киназ — генистеина, гербимицина А и и гелданамицина. Было показано, что активация CYP1A2 происходит на пост-транскрипционном уровне. Активация CYP1A1, вызванная воздействием холода или классическими CYP1A индукторов, является AhR-зависимой и происходит на уровне транскрипции. Использование ингибиторов протеин-тирозинкиназ выявило различия между молекулярными механизмами, лежащими в основе эффектов классических индукторов CYP1A и индукции в результате воздействия холодом.

При исследовании роли генетического полиморфизма ферментов биотрансформации ксенобиотиков и транспортных белков в белковой экспрессии этих генов и формировании множественной лекарственной устойчивости опухолей различной этиологии. Результаты исследования показали, что полиморфизм гена цитохрома Р4502С9 ассоциирован с прогрессией рака молочной железы у женщин, а полиморфизм генов GSTP1, MDR1 и MRP1 может быть важным фактором, определяющим предрасположенность к лимфопролиферативным заболеваниям, а также и устойчивость к лекарственной терапии.

Проведено исследование экспрессии генов, функционально ассоциированных как с процессами антиоксидантной защиты, так и способных опосредовать развитие окислительного стресса, в сетчатке двух сублиний крыс OXYS, различающихся между собой по клиническим признакам ретинопатии, и «здоровых» крыс Вистар. Исследована экспрессия генов транскрипционных факторов AhR и Nrf2, а также генов I фазы ферментов метаболизма ксенобиотиков, регулируемых AhR/XRE (СYP1A1, СYP1A2, СYP1B1), генов II фазы ферментов метаболизма ксенобиотиков, регулируемых AhR/XRE (UGT1A1,ADH 3A1), генов II фазы ферментов метаболизма ксенобиотиков, регулируемых AhR/XRE и Nrf2/ARE (NQO1, GSTA2, UGT1A6) в клетках сетчатки сублиний крыс OXYS и крыс Вистар различных возрастов. Выявлены межлинейные различия в экспрессии генов, отвечающих за баланс в клетке окислительно-восстановительных событий — транскрипционных факторов AhR, Nrf2 и регулируемых ими генов, а также особенности профиля экспрессии этих генов у преждевременно стареющих с высокой заболеваемостью ретинопатией крыс OXYS в процессе развития ретинопатии. Результаты позволяют сделать предположение, что одним из триггеров развития окислительного стресса при развитии возрастной макулодистрофии может быть врожденно пониженный уровень экспрессии AhR.

Исследована способность мелатонина модулировать экспрессию генов AhR-Nrf2-сигнальных путей в сетчатке. В сетчатке крыс OXYS и Вистар определены уровни мРНК Nrf2 и Nrf2-зависимых генов, уровни мРНК AhR и AhR-зависимых генов и генов, зависимых как от AhR, так и от Nrf2. Показано, что мелатонин в дозе, эквивалентной рекомендуемой для людей, не вызывает у крыс OXYS существенных изменений в экспрессии Nrf2-зависимых генов в сетчатке крыс OXYS, но снижает уровень мРНК AhR-зависимых генов CYP1A2 и CYP1B1.

Исследована способность митохондриального антиоксиданта SkQ1 модулировать экспрессию генов AhR-Nrf2-сигнальных путей в сетчатке крыс OXYS и показано, что Cyp1a2 and Cyp1b1 могут быть терапевтической мишенью SkQ1.

Проведено исследование, сформировавшее методические подходы для изучения секретируемых клетками микровезикул различного происхождения, а также противоопухолевые терапевтические мишени, которые могут иметь клинические перспективы в будущем.

Так, были проведены исследования по формированию методических подходов для выделения, идентификации и характеристики внеклеточных везикул из плазмы крови здоровых доноров и больных хроническим лимфолейкозом, исследованы внеклеточные везикулы из клеточных линии лимфоцитарного происхождения U937 и Raji, секретируемых под действием химиопрепаратов, входящих в схемы лечения лимфопролиферативных заболеваний.

Результаты исследования негативной регуляции CYP1A показали, что предотвратить индуцирующее действие бензопирена на активность CYP1А могут менадион, a-токоферол и кверцетин, и ингибирование активности CYP1A1 и CYP1A2 менадионом и кверцетином происходит вследствие снижения уровня транскрипции соответствующих генов, обусловленного снижением ДНК-связывающей способности AhR.

При поиске новых противоопухолевых агентов в ряду фенольных антиоксидантов и комплексов переходных металлов были исследованы цитотоксические, цитостатические, антиоксидантные активности новых оригинальных соединений, а также их способность модулировать экспрессию цитохромов Р450 3А4, 2С9 и 2С19. Установленные закономерности изменений биологических свойств в зависимости от структуры комплексов могут быть впоследствии использованы для направленного синтеза новых соединений с заданными функциональными свойствами. Из изученных соединений обозначен ряд для дальнейших исследований в качестве потенциальных противоопухолевых агентов. Предложен метод фенотипического скрининга с использованием красителей Hoechst и DiD, который позволяет выявлять соединения, обладающие активностью, схожей с активностью соединений с известным механизмом действия, и может применяться для дальнейших исследований.

Публикации

1. Grishanova, A. Y.; Perepechaeva, M. L. Aryl hydrocarbon receptor in oxidative stress as a double agent and its biological and therapeutic significance // International Journal of Molecular Sciences. — 2022. — Vol. 23. P. 6719. doi: 10.3390/ijms23126719
2. Klyushova L. S., Kandalintseva N. V., Grishanova A. Y. Antioxidant activity of new sulphur- and selenium-containing analogues of potassium phenosan against H2O2-induced cytotoxicity in tumour cells // Curr. Issues. Mol. Biol. – 2022 – July — T. 44, № 7. – C. 3131-3145. DOI: 10.3390/cimb44070216
3. Manakhov A.M., Solovieva A.O., Permyakova E.S., Sitnikova N.A., Klyushova L.S., Kiryukhantsev-Korneev P.V., Konopatsky A.S., Shtansky D.V. Adhesion and Proliferation of Mesenchymal Stem Cells on Plasma-Coated Biodegradable Nanofibers// J. Compos. Sci. — 2022– July – Т.6. Номер статьи: 193.  DOI: 10.3390/jcs6070193
4. Klyushova L.S., Perepechaeva M.L., Grishanova A.Y. The Role of CYP3A in Health and Disease// Biomedicines – 2022 – Oct. – Т. 10, №11. Номер статьи: 2686. DOI: 10.3390/biomedicines10112686
5. Eremina, J.A., Smirnova, K.S., Lider, E.V., Klyushova L.S., Sheven’ D.G.,  Potkin V.I. Nickel(II) and cobalt(II) complexes with 4,5-dichloro-isothiazole-3-carboxylic acid and 1,10-phenanthroline: synthesis, crystal structures and cytotoxicity// Transit. Met. Chem. – 2022 – Jun – Т. 47. – С. 19–30. DOI: 10.1007/s11243-021-00490-4.
6. Клюшова Л. С., Голубева Ю. А., Вавилин В. А., Гришанова А. Ю. Модулирующее действие комплексов Cu(II) с производными енамина и тетразола на CYP2C и CYP3A и их цитотоксические и антипролиферативные свойства в сфероидах HepG2 // Acta Biomed. Scient. – 2022 – Т. 7 – № 5.
7. Eremina J. A., Lider E. V., Kuratieva N. V., Samsonenko D. G., Klyushova L. S., Sheven D. G., Trifonov R. E., Ostrovskii V. A. Synthesis and crystal structures of cytotoxic mixed-ligand copper(II) complexes with alkyl tetrazole and polypyridine derivatives // Inorganica Chimica Acta. — 2021. — Feb. — T. 516. Номер статьи: 120169     DOI: 10.1016/j.ica.2020.120169 WOS:000605618300006   ISSN: 0020-1693   eISSN: 1873-3255
8. Eremina J. A., Smirnova K. S., Klyushova L. S., Berezin A. S., Lider E. V. Synthesis and cytotoxicity evaluation of copper(II) complexes with polypyridines and 5-benzyltetrazole // Journal of Molecular Structure. — 2021. — Dec. — T. 1245. Номер статьи: 131024   DOI: 10.1016/j.molstruc.2021.131024
9. Eremina Y. A., Ermakova E. A., Sukhikh T. S., Klyushova L. S., El’tsov I. V., Samsonenko D. G., Dotsenko V. V., Zubenko A. A., Fetisov L. N., Kononenko K. N., Lider E. V. Synthesis, structure, and study of the biological activity of Co(II), Ni(II), AND Cu(II) complexes with an enaminedione derivative // Journal of Structural Chemistry. — 2021. — Feb. — T. 62, № 2. — C. 309-320. DOI: 10.1134/S0022476621020165
10. Ivanova A. D., Kuz’menko T. A., Komarov V. Y., Glinskaya L. A., Sheludyakova L. A., Klyushova L. S., Lavrenova L. G. Synthesis and study of complexes of cobalt(II), nickel(II), and copper(II) halides with 2-(3,5-dimethylpyrazol-1-yl)benzimidazole // Russian Chemical Bulletin. — 2021. — Aug. — T. 70, № 8. — C. 1550-1559.   DOI: 10.1007/s11172-021-3251-y
11. Julia A. Ereminaa, Elizaveta V. Lidera, Taisiya S. Sukhikha, Lyubov S. Klyushova, Maria L. Perepechaeva, Dmitriy G. Sheven, Alexey S. Berezin, Alevtina Y. Grishanova, Vladimir I. Potkin/ Water-soluble copper(II) complexes with 4,5-dichloro-isothiazole-3-carboxylic acid and heterocyclic N-donor ligands: Synthesis, crystal structures, cytotoxicity, and DNA binding study. // Inorganica Chimica Acta. – 2020 – V. 510 – 119778. DOI: 10.1016/j.ica.2020.119778,
12. M. L. Perepechaeva , N. V. Gubanova & A. Y. Grishanova. Effects of prolonged subchronic benzo(α)pyrene exposure on rat liver morphology and CYP1A expression during treatment with menadione, quercetin, or tocopherol // Drug and Chemical Toxicology Published Online: 19 Nov 2020. https://doi.org/10.1080/01480545.2020.1849270.
13. Perepechaeva M.L. and Grishanova A.Y. The Role of Aryl Hydrocarbon Receptor (AhR) in Brain Tumors. // International Journal of Molecular Sciences, 2020, 21.
14. Кокина Т.Е., Комаров В.Ю., Глинская Л.А., Бизяев С.Н., Шелудякова Л.А., Еремина Ю.А., Клюшова Л.С., Ткачев А.В./ Cинтез, строение и цитотоксичность комплексов Pd(II) и Сu(II) с 1-терпенил-3-тиосемикарбазидами пинанового и пара-ментанового рядов. // Журнал структурной химии. – 2020 – Т.61, №1. Стр. 48. DOI: 10.26902/JSC_id49663
15. E.D. Rechitskaya, N.V.Kuratieva, E.V. Lider, J.A. Eremina, L.S. Klyushova, I.V. Eltsov, G.A.Kostin/ Tuning of cytotoxic activity by bio-mimetic ligands in ruthenium nitrosyl complexes.// Journal of Molecular Structure. – 2020 – V. 1219. DOI: 10.1016/j.molstruc.2020.128565
16. Kutyrev, I. A.; Goreva, O. B.; Mazur, O. E.; Mordvinov, V. A. A Study of Protein Fractional Composition during Incubation of Diphyllobothrium dendriticum (Cestoda) Plerocercoids in a Medium Containing Blood Serum of the Host, the Baikal Omul Coregonus migratorius (Coregonidae) // Biology Bulletin 2020.V.47.N.5.P.490-496. Doi 10.1134/S1062359020040081
17. Eremina, J.A.a,b,c, Lider, E.V.a,b,  Sukhikh, T.S.a,b, Eltsov, I.V.b, Kuratieva, N.V.a,b, Zakharov, B.A.b,d, Sheludyakova, L.A.a,b, Klyushova, L.S.c,g, Ermakova, E.A.a,b, Dotsenko, V.V.e,f . Synthesis, crystal structures, spectroscopic, and cytotoxicity study of Cu(II), Co(II), Ni(II) and Pd(II) complexes with 2-anilinomethylidene-5,5-dimethylcyclohexane-1,3-dione(Article).   Polyhedron . Volume 178, 1 March 2020, Номер статьи 11432
18. J.A. Eremina, E.V. Lidera, D.G. Samsonenkoa, L.A. Sheludyakova,
19. A.S. Berezin, L.S. Klyushova, V.A. Ostrovskii, R.E. Trifonov. Mixed-ligand copper(II) complexes with tetrazole derivatives and 2,2′-bipyridine, 1,10-phenanthroline: Synthesis, structure and cytotoxic activity. Inorganica Chimica Acta,. 2019 V. 487, p 138-144. https://doi.org/10.1016/j.ica.2018.12.011
20. Alexander N. Makhinya, Julia A. Eremina, Taisiya S. Sukhikh, Iraida A. Baidina,Maxim A. Il’in, Lyubov S. Klyushova, and Elizaveta V. Lider. Cytotoxicity and Crystal Structures of Nitrosoruthenium Complexes mer-[Ru(NO)Py2Cl3] and mer-[Ru(NO)(γ-Pic)2Cl3]. ChemistrySelect 2019, 4, 5866 –5871
21. Tatyana E.Kokina, Ludmila A.Glinskaya, Liliya A.Sheludyakova, Yuliya A.Ereminaa, Lubov S.Klyushova, Vladislav Yu.Komarov, Dmitriy A.Piryazev, Alexey V.Tkachev, Stanislav V.Larionov. Synthesis, structure, and cytotoxicity of complexes of zinc(II), palladium(II), and copper(I) chlorides with (−)-camphor thiosemicarbazone. Polyhedron Volume 163, 1 May 2019, Pages 121-130
22. Anna Lyamkina, Maria Perepechaeva, Alevtina Grishanova, Olga Berezina, Igor Kovynev, Tatiana Pospelova. The expression level of the miR203a gene in patients with chronic myeloid leukemia in different phases of the disease. 24th Congress of European Hematology Association, Amsterdam, Netherlands, 2019
23. М.Л. Перепечаева, Д.В. Телегина, А.Ю. Гришанова. Экспрессия генов AhR- и NF-kB-зависимых сигнальных путей в отделах мозга и сетчатке преждевременно стареющих крыс OXYS. Acta Naturae, 2019, спецвыпуск том 2, р.210.

Сотрудники лаборатории

1. Горева Ольга Борисовна, к.б.н.
   https://orcid.org/0000-0002-8129-9176
   obgoreva@frcftm.ru, +7 (383) 274-95-55
2. Перепечаева Мария Леонидовна, к.б.н.
   https://orcid.org/0000-0001-5791-3714
   mlperepechaeva@frcftm.ru
3. Клюшова Любовь Андреевна, к.б.н.
   https://orcid.org/0000-0003-4820-2536
   klyushovals@mail.ru
4. Голубева Юлия Александровна, к.х.н.
   https://orcid.org/0000-0002-5404-5357